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士锋生物的细胞培养基的实验步骤和注意事项
点击次数:602 更新时间:2013-10-22

细胞培养基的基本要求

1.营养成分

氨基酸、单糖、维生素、无机离子与微量元素。

2.促生长因子及激素

3.渗透压

4.pH

5.无毒、无污染

七、细胞培养基组成及作用

1.氨基酸

组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异,但有几种氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少时,细胞生长不良而死亡。

必需氨基酸包括L-、L-、L-异、L-、L-赖氨酸、L-蛋氨酸、L-苯、L-、L-、L-等。

2.维生素

维持细胞生长的生物活性物质,在细胞代谢中起调节及控制作用。在细胞培养中,尽管血清是维生素重要来源, 但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。

如:A、D、E、K。

如:B1、B2、B6、B12、泛酸、、、C、等。

许多维生素参与构成各种酶的活性基团的成分,没有它们,酶便没有活性,代谢活动将无法进行。

VA是细胞合成糖蛋白时寡糖基的载体,对上皮细胞有重要的维护作用。VD参与调节钙的吸收。VE是抗氧剂,可防止组成生物膜的磷脂中不饱和脂肪酸被氧化。VK缺乏会引起低原及凝血时间延长。

是合成四氢的重要原料,四氢在核酸的生物合成和蛋白质的生物合成过程中起重要作用。

是一些特异羧化酶的组成部分,参与糖代谢和脂肪酸的合成过程。

3.碳水化合物

碳水化合物是细胞生长主要能量来源,其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。

4.无机离子

钠、钾、镁、钙、磷等基本的无机离子,这些都是细胞组成所必须并参与细胞的代谢。

培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外,通过提供钠,钾和钙离子,帮助细胞调节细胞膜功能。培养液的渗透压是一个非常重要的因素, 细胞通常可耐受260mOsm/kg −320 mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意:向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压,特别是溶于强酸或强碱中的物质。

Na+是细胞外液中zui主要的阳离子,对维持渗透压的恒定有决定性的作用。K +主要分布在细胞内液,细胞内K +的对于激活某些酶是必需的,它在调节细胞内环境的酸碱平衡也有极重要意义。 Ca2+ 在细胞外液中的作用是将组织内部细胞之间相互粘着,在细胞内参与许多重要的细胞生理活动,如传导、参与肌肉细胞收缩等。 Mg2+ 是构成细胞间质的重要成分,对于细胞间相互稳定结合有很重要的意义。磷的化合物对细胞物质代谢和生理功能调控的功用是十分广泛而*。

 
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