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细胞凝集反应的实验原理和方法
点击次数:897 更新时间:2014-11-28

实验原理

细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为:细胞间的,细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。

 凝集素(lectin)是一类含糖的(少数例外)并能与糖等专一性结合的蛋白质,它具有凝集细胞刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成桥的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

实验用品 

  1、土豆块茎。
  2、显微镜、粗天平、载玻片、滴管2支、离心管2支。
  3、PBS缓冲液
  称取NaC 17.2g、Na2HP04 1.48g、KH2PO40.43g、加蒸馏水,定容至1000ml调pH值到7.2。
  4、2%的红细胞。

以无菌方法抽取兔子静脉血液(加抗凝剂),用生理盐水洗5次,每次2000r/min,离心5min,zui后按压积红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞液。

实验方法

称取土豆去皮块茎2g,加10ml PBS缓液,漫泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集索。

用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞液各一滴,置载玻片上,充分混匀,静置20min后于低倍显微镜下观察血球凝集现象。

以PBS液加2%血细胞液作对照实验。

 
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