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士锋生物重组质粒的构建设计
点击次数:779 更新时间:2015-11-17

基因工程又称遗传工程、DNA 重组技术、分子克隆等。它是七十年代在分子生物学发展的基础上形成的新学科。所谓基因工程,就是在分子水平上,用人工方法提取(或合成)某一生物的遗传物质,在体外切割,拼接和重新组合,然后通过载体把重组的DNA 分子引入受体细胞,使外源DNA 在受体细胞中进行复制和表达。按人们的意愿定向创造生物新性状,使之稳定地遗传给下一代。所以基因工程具有广阔的应用前景,即能为工农业生产和工医药保健等开拓新途径,又能为生物的细胞分化,生长发育,肿瘤发生等基础研究提供有效的实验手段。
近十余年来,基因工程的发展和应用,迅速地推动了生物科学的发展,目前,基因工程技术已成为生物学领域许多实验室的常用技术,它的性和普及性使人们感到有必要在大学的教学课程中得到反映。所以,我系已为十几届本科生、研究生开设了基因工程技术实验,选择一些zui基本,zui常用的技术,以使同学对基因工程有一个基本的了解,并能掌握一些基本技术。
但是基因工程的实际技术和实验系统正在不断的创新,新方法、新技术不断推出,而且在有限的学时内,所能触及的技术只是基因工程中极少的一部分,但从教学角度来看,是不可能面面俱到。我们只是希望通过本实验,让同学通过基因工程中zui基本的技术训练,为今后独立工作打下基础。
本实验设计主要参考书为T·Maniatis 的《Molecuiar clong》第三版,彭秀玲等编著的《基因工程实验技术》等。实验中所选择的方法和条件以适合于本实验室设备为,具体参考应用时,可作适当更改。
本套实验设计过程如下:
1. 染色体DNA的抽提
2. PCR 扩增分离目的DNA 片段
3. 载体貭粒的抽提、纯化及检测
4. 载体及目的DNA 片段的限制性核酸内切酶酶切与连接
5. 重组貭粒转化大肠杆菌
6.重组子的筛选、重组质粒的抽提与鉴定

 
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