核糖核酸酶是催化RNA水解、作用于RNA中的3′，5′-磷酸二酯键的内切酶，分别生成5′-磷酸核苷和3′-磷酸核苷。

核酸分解的*步是水解核苷酸之间的磷酸二酯键，在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的核酸酶。不同来源的核酸酶，其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA，称为核糖核酸酶(RNase)。

催化RNA水解的一种核酸内切酶。反应产物是单核苷酸和寡核苷酸。不同核糖核酸酶催化产物的低聚核苷酸组成有差别。核糖核酸酶T1使之产生单核苷酸和以3'-鸟苷酸为组成的或末端为3'-鸟苷酸的低聚核苷酸。核糖核酸酶T2使之产生单核苷酸和以3'-腺苷酸为组成的或末端为3'-腺苷酸的低聚核苷酸。

绝大部分的核糖核酸酶需要二价阳离子作为辅因子(例如Ca，Mg等)。因此活性可因乙二胺四乙酸(EDTA)的存在而阻断。胰核糖核酸酶是3'-嘧啶核苷酸由红酵母发酵液提制而得的核糖核酸酶，其药用油膏可局部外用于治疗外伤及关节疼痛。