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研究开发N-磷酸化蛋白质组深度覆盖分析新方法
点击次数:453 发布时间:2021/1/13
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上海士锋生物科技有限公司
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近日,中国大连化学物理研究所生物分子高效分离与表征研究组研究员张丽华和中科院院士张玉奎团队,发展出N-磷酸化肽段高选择性富集新方法,并结合肽段的高效分离和高灵敏度鉴定,实现了N-磷酸化蛋白质组的深度覆盖分析。
与研究相对深入的发生在、和侧链氨基上的蛋白质O-磷酸化修饰相比,发生在蛋白质、和赖氨酸上的N-磷酸化修饰,由于P-N酰胺键具有较高的吉布斯自由能,且易发生水解,目前仍缺乏有效的N-磷酸化蛋白质组分析方法,制约了人们对其生物学功能的认识。
该团队研制出具有核壳结构的亚二微米硅球,并通过在硅球表面键合双二甲基吡啶胺双锌分子,在中性条件下实现了N-磷酸化肽段的高效、高选择性、快速富集;通过基于该材料的on-tip富集方法和液质联用分离鉴定的结合,从HeLa细胞中鉴定到3384个N-磷酸化位点(目前大的哺乳动物N-磷酸化数据集),并发现N-磷酸化位点附近高度表达;建立的N-磷酸化蛋白质组分析新方法为深入研究其生物学功能提供了基础数据,并为推动医学、合成生物学等领域的发展提供了技术支撑。
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