MDCK细胞培养

一、目的

MDCK细胞培养是分离流感病毒及相关研究实验的基本技术。疾控中心的所有技术人员，必须按照本文件相关的操作规程进行操作。

二、适用范围

适用于疾控中心所有技术人员 。

三、程序

（一）生物安全要求

实验室生物安全级别：BSL-1

所有操作必须在BSL-1实验室的生物安全柜里进行。

（二）材料

1. 生长成片的MDCK细胞

2. 无菌的T25细胞培养瓶

3. D-MEM培养液（含有L-）

4. 青、母液（10000 U/mLG；10000µg/mL硫酸），分装后保存于-20℃

5. HEPES缓冲液，1M母液

6. 胎牛血清

7. EDTA-（0.05%，0.53mM EDTA-4Na），分装后保存于-20℃

8. 7.5%牛血清白蛋白组分V

9. 1mL、10mL无菌移液管

10. 70％～75％的酒精

注意事项：经常检查试剂使用的有效期。