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从血液和组织中提取RNA的方法及其区别

点击次数:660 发布时间:2014/12/15
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1、无菌采集静脉血2 ml注入盛有2 ml Hank's液(含100 u/ml肝素)的试管中,混匀。

2、吸取淋巴细胞分层液2 ml加入离心管中,再将稀释抗凝血液小心沿管壁加至分层液上,应注意保持两者界面清晰(关键)。

3、室温2000 r/min离心20 min。管内可分为四层。

4、将上层淡黄色的稀释血浆取出于洁净试管中-20 ℃保存。

5、用毛细吸管轻轻吸出乳白色的单个核细胞,加入另一支已含有2-5 mlHank's液的离心管中,混匀。

6、室温下,1500rpm离心10min。

7、弃上清,重复洗涤一次。用*RPMI-1640 1 ml定容,计数细胞,调整细胞悬液至所需浓度:一般每ml血可分离出1-2×106个单个核细胞。

淋巴细胞分离出来以后取血和细胞就一样的步骤了:加Trizol裂解细胞,之后进行RNA的抽提

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