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士锋生物293/293T细胞详细介绍
点击次数:746 更新时间:2013-10-15

1、种属都为人,不是鼠。

2、来源:293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。

3、形态为上皮细胞,能致瘤。

4、染色体核型:亚三倍体人细胞系。染色体众数为64,30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der(1)t(1;15) (q42;q13), der(19)t(3;19) (q12;q13), der(12)t(8;12) (q22;p13),还有四条标记染色体,有的细胞另有5条标记染色体。der(1)与M8 (or Xq+)常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体,两条Xq+,一条Xp+。

5、是贴壁细胞。

6、293:弃培养基,含0.25% , 0.03% EDTA 消化液洗涤,弃去,加1-2ml消化液室温或37℃消化。加入新鲜培养基,吸出,分到新培养皿中。一传二至一传四。293T:生长快,通常倍增时间不到一天 。每3~4 天1:10至1:20稀释,5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松,可只用EDTA消化,不要用过度消化。每两到三天换液一次。

7、冻存液:95%培养基;5%,DMSO;

8、培养条件:ATCC培养基:90%的MEM Eagle,加入2mM L-,1.5g/L,0.1 mM必需氨基酸,1.0 mM 丙酮酸钠;10%加热灭活的马血清37℃培养.
 

 
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